• 抗体基础知识培训 
    第 2 部分:储存与处理



    欢迎参加我们的抗体选择及使用培训。本期培训的主题包括根据需求选择合适的抗体、抗体处理及储存、抗体验证及疑难解答等方面。

    在该培训系列第 2 部分,您将学到如何正确储存及处理您的抗体。大多数保存得当的抗体,其活性保持时间可长达数月甚至数年。

    请记住,务必参考制造商提供的数据表,以获取具体储存建议。


    第 2 部分 概述

    2.1 新抗体的处理
    2.2 偶联抗体的储存
    2.3 常见问题解答


    2.1 新抗体的处理

    收到新抗体后,请采取以下措施:



    离心
    重中之重:收到抗体后,对装有抗体的小瓶进行离心。运输过程中,瓶内液体发生晃动,因此会有液体滞留在盖子上。将小瓶放在离心机上快速离心(10,000 xg,20 秒),可以确保珍贵的抗体回落到小瓶底部,以确保抗体全部可用。



    分装
    使用时,您不会希望反复从冰箱中取出再放回整个小瓶,因此,不妨按 10 µL 一份分装抗体。这样,您可以随时按需取用抗体。分装量越少,浓度就越容易受到蒸发以及储存瓶表面吸附的影响,因此分装量不应少于 10 µL。

    为防止微生物污染,在抗体溶液中应加入叠氮化钠,其终浓度为 0.02%(质量百分比)。需要指出的是,如果用抗体对活细胞进行染色或处理,或者用抗体进行 in vivo 研究, 请勿使用 叠氮化钠。这种抗菌剂对大部分生物体都有毒害作用,因为它会阻断细胞色素电子传递系统。

    查看我们的 叠氮化钠去除实验方案,了解何时及如何去除抗体溶液中的叠氮化钠。



    储存
    关于储存,请记住,反复冻融可使抗体变性,使其形成聚合物,从而降低抗体的结合能力。因此,请确保分装后的抗体只冻融一次,如有剩余,可在 4°C 下保存。您应该将抗体储存在 -20°C,因为 -80°C 下储存抗体并无明显优势。大多数情况下,收到抗体后可在 4°C 下储存一周至两周。

    避免使用无霜冰箱:虽然您的实验室不太可能会反复冻融,但还是要提醒您应避免反复冻融。同理,抗体应该放置于冰箱中温度变化最小的部位,如应放置于冰箱格里,而不应放置于冰箱门上。


    2.2 偶联抗体的储存

    平常多留意偶联抗体,因为它们比未偶联抗体更复杂。以下是关于正确储存和处理偶联抗体的几点建议。

    荧光标记,如 Alexa Fluor®, Dylight®, FITC, PE HRP
    处理 收到产品后立即分装

    避免反复冻融

    避光储存
    收到产品后立即分装

    避免反复冻融

    避光储存
    分装 分装时避免光线直射

    收到抗体后,以 10,000 xg 离心 20 秒

    分装前用移液枪轻柔混匀。重复 3 - 4 次。请勿倒转混合,避免溶液起泡
    分装时避免光线直射

    收到抗体后,以 10,000 xg 离心 20 秒

    请勿在 HRP 偶联抗体中加入叠氮化钠,因为这种防腐剂会抑制 HRP 的活性
    长期储存 遵循制造商数据表上的建议

    -20°C 储存

    储存在深色小瓶或用锡箔纸包裹的试管内
    遵循制造商数据表上的建议

    如含冷冻保护剂(例如甘油),则 -20°C 储存

    储存在深色小瓶或用锡箔纸包裹的试管内
    短期储存 + 4°C 短期储存(1 - 2 周) + 4°C 短期储存(1 - 2 周)


    *冻溶酶联抗体不仅会降低酶的活性,还会影响抗体结合能力。除非抗体内含冷冻保护剂并且其长期储存在 -20°C 下的稳定性已经通过验证,否则切勿冻存酶联抗体,应将其保存在 4°C 下。


    2.3 抗体储存及处理常见问题解答

    在以下视频中,我们解答了关于抗体储存及处理的常见问题。


    有关干冰的常见问题解答。


    小结

    以下是本期课程的简单摘要,以防您错过任何信息: 

    • 新抗体以 10,000 xg 离心 20 秒,使液体回流至瓶底
    • 抗体可短期储存在 4°C 下(1 - 2 周)                     
    • 分装,每份 ≥ 10 µL
    • 分装抗体仅可冻融一次
    • 仅在需要时加入叠氮化钠,勿对 HRP 偶联抗体使用叠氮化钠
    • -20°C 下长期储存抗体,除非制造商数据表另有要求
    • 务必参考制造商提供的数据表,以获取具体储存建议
    • 请勿使用无霜冰箱
    • 抗体可以储存在 -80°C,但没有必要,除非供应商明确建议如此

    以上就是第 2 部分的内容!

    接下来,我们将介绍如何使用您的抗体。您将了解到以下信息:

    • 抗体验证
    • 对照品选择
    • 实验优化
    • 有效分步实验方案

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